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四环素阴胎牛血清

  • 产品编号:

    FBS1003

  • 产品规格:

    500mL

  • 目录价格:

    ¥3500

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产品简介
产品特点
用途
注意事项
应用文献

产品简介

翼飞雪四环素阴胎牛血清是采用国产优质血清原料制备而成,通过独家专利工艺彻底去除胎牛血清中残留的四环素及其代谢产物,最大程度避免背景诱导表达的干扰。

本血清专为Tet-On/ Tft-Off基因调控系统设计,是高端基因表达与合成生物学实验汇总的周旋基础培养试剂。

产品特点

1、无四环素残留,保障诱导系统精准性:四环素残留低于检测限,彻底避免对四环素调控系统的背景干扰,确保诱导基因表达实验的严谨性、高灵敏度与高准确性。

2、低内毒素,高兼容性:内毒素含量低于10EU/mL,充分满足免疫细胞、干细胞、工程细胞等对内毒素。

3、三重超滤除菌,兼容敏感细胞系统:经过三重 0.1μm 级过滤,支原体、病毒、血红蛋白等检测均为阴性,提供安全无菌的培养环境,杜绝污染风险。

4、完整的质量检测报告:提供四环素残留、内毒素、支原体、病毒等指标的完整质检报告。

用途

应用方向                

推荐细胞类型                        

说明                     

Tet-On/TetOff表达系统   

HEK293-Tet、CHO-Tet、 U2OS-Tet、HepG2-Tet。

搭载四环素调控元件的工程细胞,常用于诱导表达报告基因、转录因子、shRNA等。

DOX 诱导可控 

表达系统  

HEK293-DOX、NIH3T3-Tet、A549-Tet、C2C12- Tet。

常用于转录调控机制研究、药物筛选、高可控性的基因功能研究。

慢病毒/逆转录病毒包装细胞         

HEK293T、Lenti-X 293、293FT。

表达系统对调控背景高度敏感,需血清无干扰,确保包装效率和病毒滴度。

单克隆筛选与稳定株构建           

CHO-K1、BHK-21、293F、NS0

四环素残留会影响筛选压力与稳定表达,易造成背景表达或筛选失败。

可控诱导干细胞体系             

iPSC-Tet、NSC-Tet、MSC-Tet、ESC-Tet

干细胞诱导分化与重编程中广泛使用四环素调控系统,要求极低残留背景环境。

免疫细胞工程

Jurkat-Tet、THP-1-Tet、 

RAW264.7-Tet

在 T/B 细胞或巨噬细胞中构建可诱导表达模型,探索免疫调控机制。

蛋白表达与重 组生产

Expi293-Tet、FreeStyle 293-Tet、CHO-S-Tet

适用于在高度可控环境下生产药物蛋白、抗体或疫苗蛋白的表达系统。

注意事项

一、首次更换使用血清建议

1、在完全培养基中,按照原使用血清:新使用血清比例=3:1的比例,进行换液/传代,细胞正常状态培养1-2天。

2、在完全培养基中,按照原使用血清:新使用血清比例=1:1的比例,进行换液/传代,细胞正常状态培养1-2天。

3、在完全培养基中,全部使用 新使用血清,进行换液/传代,成功替换血清。

首次使用血清更换比例     

培养基体系(20mL为例)                               

3:1

1.5mL原血清+0.5mL 翼飞雪血清+18mL基础培养基。

1:1

1mL原血清+1mL 翼飞雪血清+18mL基础培养基。

0:4

2mL 翼飞雪血清+18mL基础培养基。

成功替换血清

剩余6.5mL翼飞雪血清直接配制完全培养基。

二、注意事项

1、怎样正确溶解血清?

血清建议的长期储存条件是-20℃至 -40℃冰柜或者-80℃冰箱。血清溶解时,保存在-40℃以下温度的,应先转移到-20℃ 3小时以上,随后于2-8℃冰箱使之部分溶解,然后室温条件下完全溶解。

溶解过程中,需要有规则的轻微摇晃混匀,避免血清中蛋白物质凝聚导致产生絮状物。

2、血清中可能出现的沉淀物是什么?

A. 纤维蛋白:纤维蛋白是血清解冻时经常出现的较大沉淀物,可达1-2mm。

B. 磷酸钙:磷酸钙也是常见的一种沉淀物,通常会使血清出现浑浊,并且在37°C培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点,这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。

C. 胆固醇、脂肪酸酯、其他蛋白质。

大量实验以及经验表明:沉淀物不会影响细胞培养。 

3、血清解冻后可能出现絮状沉淀物,应该怎样处理?

A. 将血清分装至无菌离心管内,400-600g离心5min,取上清加入培养基内进行细胞培养。

B. 不建议以过滤的方式去除絮状沉淀物,因为一方面可能会堵塞过滤膜,另一方面可能会导致血清中不分营养成分的流失。

4、为什么有的血清需要热灭活?

A. 胎牛血清在完全解冻后,进行轻微摇匀,放置56℃温水浴30min,即为热灭活。

B. 加热可以灭活血清中的补体系统,使补体去活化。激活的补体可以刺激平滑肌收缩、细胞和血小板释放组胺、激活淋巴细胞和巨噬细胞,同时还能够参与溶解细胞的过程。

加热可以灭活血清中的补体系统,使补体去活化。通常未灭活的补体能够刺激平滑肌收缩、肥大细胞和血小板组胺的释放、激活淋巴细胞和巨噬细胞,同时还能够参与溶解细胞的过程。 

5、是否所有的血清都需要热灭活?

大多数的细胞无需进行热灭活,进过热灭活处理的血清,对细胞的生长只有微小的促进作用,甚至没有任何作用。                                                              在免疫学研究和ES细胞、昆虫细胞、平滑肌细胞的培养过程中,推荐使用热灭活血清。     因此,是否需要对血清进行热灭活处理,完全取决于用户根据自己的研究需求。

应用文献

暂无。

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