改良型还原型/氧化谷胱甘肽（GSH/GSSG）含量检测试剂盒

产品简介

谷胱甘肽（Glutathione）是由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽，在许多生物过程中发挥着关键作用，包括蛋白质和DNA合成、氨基酸转运和氧化应激保护，是保护细胞免受活性氧损伤的主要抗氧化剂之一。还原型谷胱甘肽(GSH)可将细胞质蛋白质中的二硫键还原为半胱氨酸，而还原型谷胱甘肽转化为氧化型谷胱甘肽(GSSG)。

氧化型/还原型谷胱甘肽检测试剂盒是基于GSH、5.5-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)(5.5-dithiobis-2-nitrobenoic acid, DTNB)和谷胱甘肽还原酶(GR) 之间的酶促循环反应，可准确检测生物样本中的总谷胱甘肽、还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量。检测原理为DTNB与还原型谷胱甘肽(GSH)反应生成黄色2-硝基-5-巯基苯甲酸(TNB),在412 nm处的吸光度与样品中的谷胱甘肽浓度成正比。通过使用掩蔽来封闭GSH,本试剂盒还可用于检测氧化型谷胱甘肽(GSSG)。该检测方法不受其它含巯基的生物分子干扰，能够特异性检测GSH和GSSG,试剂盒的线性检测范围宽（0.1-3uM GSH），检测下限低（~10nM GSH）。

翼飞雪氧化型/还原型谷胱甘肽检测试剂盒适用于定量检测全血、血浆、血清、尿液以及组织和细胞提取物中的还原型和氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)。100T至少可以检测100个样品。

试剂盒组成

样本处理方式

1、组织：称取后迅速剪碎用液氮研磨成粉末，按照10mg组织样品粉末加入100μL蛋白去除剂的比例，充分混匀后用玻璃匀浆仪进行组织匀浆，4℃ 孵育 10min，4℃ 10000g离心10min，取上清待测。（注：A. 样品立即用于检测可4℃短暂保存，短期内不进行检测可-80℃储存，但保存时间不建议超过1周。B. 对于比较容易匀浆的组织，可不需要液氮速冻，直接匀浆。）

2、细胞：收集细胞（200-500万个）并用PBS洗涤一次，加入3-5倍细胞沉淀体积的蛋白去除剂，充分混匀后超声波裂解细胞，4℃ 10000g离心10min，取上清待测。（注：A. 尽量使用新鲜细胞进行测定，因为冷冻细胞测定数据不准确。B. 样品裂解后需立即转移至冰上，以防GSH在空气中氧化成GSSG。C. 样品立即用于检测可4℃短暂保存，短期内不进行检测可-80℃储存，但保存时间不建议超过1周。）

3、红细胞/血浆：取新鲜血液，600g 离心10min，沉淀为红细胞，上清为血浆。血浆可直接进行检测；红细胞用PBS洗涤两次，取50µL沉淀，加入50µL蛋白去除剂，4℃或冰浴充分混匀，超声波裂解细胞，4℃ 10000g离心10min，取上清待测。

注意事项

1、 本试剂盒检测时涉及氧化还原反应，因此在制备细胞或组织提取物时避免使用还原型物质，如DTT、B-巯基乙醇、TCEP等。

2、 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

3、 本产品仅限于专业人员的科研使用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。