改良型ATP含量检测试剂盒

产品简介

腺苷-5-三磷酸(ATP)是细胞中的能量分子，在细胞的各种生理、病理过程中至关重要。ATP在活细胞的光合作用和细胞呼吸过程中产生，并在生物合成反应、运动和细胞分裂等细胞过程中消耗。

翼飞雪改良型ATP检测试剂盒可快速检测细胞内ATP含量。原理为ATP在荧光素酶(Firefy Luciferase)的作用下与底物荧光素(Luciferin)反应，伴随化学发光。该反应特异性高，是目前最精确的ATP检测手段。当荧光素酶和荧光素底物均过量时，在一定浓度范围内发光强度与ATP浓度成正比，通过测定发光强度来检测样品中ATP浓度。

本试剂盒适用于细胞、组织和其他生物样本中的ATP检测。100 T至少可以检测100个样品（96微孔板）。

试剂盒组成

样本处理方式

1、贴壁细胞：

A. 吸除培养基，按照6孔板加入150-200μL裂解液裂解细胞（可使用移液器吹吸裂解液，使细胞充分裂解）。

B. 4℃ 12000g离心5min，取上清即为待测样品。 

2、悬浮细胞：

A. 离心收集细胞，按照6孔板加入200μL裂解液裂解细胞（可使用移液器吹吸裂解液，使细胞充分裂解）。

B. 4℃ 12000g离心5min，取上清即为待测样品。

3、组织：

A. 按照每20mg组织加入100-200μL裂解液，用玻璃匀浆仪或其他匀浆仪进行匀浆，使组织完全裂解。

B. 4℃ 12000g离心5min，取上清即为待测样品。

注意事项

1、 样品体积可根据样品中ATP的含量在10-50μL范围内调整，此时标准品体积需同步调整，与待测样品体积保持一致。 本试剂盒在1nM-5000nM标准品体系中有良好的线性关系。

2、 如果待测样品中ATP含量过高，可用1×ATP检测缓冲液稀释后再进行检测。

3、 也可以通过BCA或者Bradford法检测样品中蛋白浓度，并以蛋白含量对ATP含量进行归一化，最终结果可表示为ATP含量（nmoL ATP/mg蛋白）。

4、 ATP检测试剂中有荧光素酶 (Firefly Luciferase)蛋白制品，冻融会使其失活，应避免反复冻融，建议ATP检测试剂稀释后一次性用完。

5、 ATP不稳定，裂解后样品需在4°C或冰上操作。ATP在冰上可稳定4-6h。

6、 本试剂盒需配套使用化学发光仪，如果没有可选择液闪仪检测，检测灵敏度取决于液闪仪的灵敏度和精确度。 使用化学发光的多功能酶标仪时，建议配套不透光的96孔白板或黑板。

7、 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。 8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。