YFX-CPM102
5×10^5cells/T25瓶
¥3100
小鼠心肌成纤维细胞分离自心脏组织;心脏由心肌细胞和非心肌细胞组成,非心肌细胞占细胞总数的70%,其中90%以上的非心肌细胞由心肌成纤维细胞组成。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。小鼠心肌成纤维细胞主要功能为对心肌细胞起结构支持作用并负责细胞基质外的合成,当心肌损伤时能产生旁分泌生长因子。小鼠心肌成纤维细胞是心脏结缔组织中最常见的细胞,可合成和分泌胶原纤维、弹性纤维、网状纤维及有机基质,并且在外伤等因素刺激下,部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞,其功能活动也得以恢复,参与组织损伤后的修复。因此,对小鼠心肌成纤维细胞的生理学研究成为现代心血管领域研究的一个重点。
2-3代
成纤维细胞样,贴壁生长。
每2-3天换液一次
小鼠心脏组织
小鼠心肌成纤维细胞采用胶原酶 - 胰蛋白酶联合消化结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1、取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37°C、5% CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2、贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养 瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37°C温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变 圆后,再加入5mL完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37°C、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察,用于实验; 之后再按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
1、完全培养基4°C调价下可稳定储存3个月。
2、消化过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁以及生长状态。
3、建议受到细胞后,前3天内每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,以便必要时与技术人员沟通。
4、由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时与我们联系,详细告知细胞的具体情况,以便我们技术人员跟进。