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抗体洗脱液/膜再生液(Stripping Buffer)

  • 产品编号:

    YWB009

  • 产品规格:

    100mL/500mL

  • 目录价格:

    ¥80/¥350

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产品简介
实验案例
注意事项

产品简介

抗体洗脱液/ Stripping Buffer又称膜再生液或Western一抗二抗去除液,用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用,在Western中完成了一抗二抗结合和后续的化学发光检测后,有时还需要检测GAPDH、β-actin等表达量相对稳定的管家蛋白或其它蛋白作为参照。Stripping Buffer可以洗脱一抗二抗,非常方便地重新利用使用过的膜,检测其它蛋白,Stripping Buffer多次重复使用同一张膜,会导致蛋白信号的减弱不宜重复利用膜,一般可以利用2~3次。

翼飞雪抗体洗脱液/ Stripping Buffer(强碱性)主要依靠碱性来解除一抗二抗的结合,同时又不会导致转移到膜上的蛋白的损失, 适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用,尤其适用于PVDF膜,其次为硝酸纤维素膜,非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB,NBT/BCIP)不适用于本试剂。

实验案例

1、在膜完成Western化学发光检测之后,蒸馏水漂洗5min。

2、弃去蒸馏水,加入抗体洗脱液,确保完全覆盖膜。

3、摇床漂洗5-20min。

4、尽量把抗体洗脱液弃除干净(必要情况下,可使用滤纸吸干)。

5、加入蒸馏水震荡漂洗3-5min,漂洗2-3次。

6、加入封闭液进行封闭(推荐酪氨酸或者脱脂奶粉作为封闭液),进行Western后续操作。

注意事项

1、使用辣根过氧化物酶标记的抗体时,封闭液必需使用5%脱脂奶粉进行配制。

2、使用碱性磷酸酶标记的抗体时,封闭液必需使用酪蛋白进行配制。

3、强碱性的抗体洗脱液特别适用于PVDF膜的再生,硝酸纤维素(NC)膜的再生效果明显若于PVDF膜。

4、强碱性的抗体洗脱液适用于ECL等类似的化学发光液检测后的一抗二抗洗脱,非化学发光试剂进行的Western检测(如DAB、NBT/BCIP)不适用于本试剂。

5、本缓冲液带有请为腐蚀性,使用时请注意保护。

6、为了您的安全盒健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。

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