YFX0246
100管/96样
¥310
微量法
GSH是细胞内最主要的抗氧化巯基物质,在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值(GSH/GSSG)是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此,测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
DTNB与GSH反应生成复合物,在412nm处有特征吸收峰;其吸光度与GSH含量成正比。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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试剂一 |
液体100mL×1瓶 |
4℃,避光 |
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试剂二 |
液体20mL×1瓶 |
4℃ |
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试剂三 |
液体5mL×1瓶 |
4℃,避光 |
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标准品 |
粉剂×1管:临用前加入1mL蒸馏水,即为10mg/mL的GSH母液。 |
4℃,避光 |
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、细胞/细菌:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),冰浴超声波破碎细菌或细胞(功率300W,超声3s,间隔7s,总时间3min);12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、液体样本:吸取100μL样本,加入100μL试剂一充分混匀,12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
1、 ΔA线性范围为0.006-0.8,可测定谷胱甘肽浓度范围2.5-300μg/mL; 如果样本ΔA大于0.8,建议用试剂一稀释待测液后重新测定(计算公式中乘以相应的稀释倍数);如果小于0.006,建议适当增加样本量。
2、 样品处理过程尽量在冰上迅速完成,提取后待测样本应放置于冰上保存,并建议当天完成检测。
3、 试剂一中含有蛋白质沉淀试剂,待测样本不能用于蛋白浓度测定,需另取组织使用1×PBS或生理盐水按照与待测样本相同的样本浓度重新提取后,再进行蛋白含量测定。