YFX0245
50管/48样
¥220
可见分光光度法
GSH是细胞内最主要的抗氧化巯基物质,在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等中具有重要作用。还原型与氧化型比值(GSH/GSSG)是细胞氧化还原状态的主要动态指标。因此,测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值,能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。
DTNB与GSH反应生成复合物,在412nm处有特征吸收峰;其吸光度与GSH含量成正比。
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名称 |
规格 |
储存条件 |
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试剂一 |
液体 50mL ×1瓶 |
4℃ |
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试剂二 |
液体 50mL ×1瓶 |
4℃ |
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试剂三 |
液体 15mL ×1瓶 |
4℃,避光 |
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标准品 |
粉剂10mg ×1管 |
4℃,避光 |
1、组织:新鲜组织首先用PBS冲洗2次,然后称取动物组织或者植物组织0.1g。加入用试剂一润洗过的匀浆器中(匀浆器提前放冰上预冷);然后加入1mL 试剂一(组织/试剂一比例保持不变即可),迅速冰上充分研磨(使用液氮研磨效果更好);8000rpm 4℃离心 10min;取上清液放置于 4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存10天)。
2、细胞/细菌:收集不少于 106 个细胞,首先用PBS清洗细胞2次(PBS 重悬细胞,600g 离心10分钟),加入3倍细胞沉淀体积的试剂一重悬细胞,反复冻融 2-3 次(可在液氮中冻结,37℃水浴中溶解),8000g 离心10分钟,收集上清于 4℃ 待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存 10 天)。
3、血浆样本:将收集的抗凝血于 4℃,600g 离心10分钟,吸取上层血浆到另一支试管中,加入等体积的试剂一, 4℃,8000g 离心10分钟,将上清移入新的试管中放置于 4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存 10 天)。
4、血细胞样本:将收集的抗凝血于 4℃,600g 离心10分钟,弃去上层血浆用3倍体积的 PBS 清洗3次(用 PBS 重悬血细胞,600g 离心10分钟),加入等体积试剂一,混匀后 4℃放置10分钟,8000g 离心10分钟,吸取上清放于 4℃待测,若暂时不能完成测试可放于-80℃保存(可保存10天)。
1、 样品处理需匀浆完全,若当天不能完成测量,可放-80℃保存。
2、 标准品:还原型谷胱甘肽现配现用。
3、 若不确定样品中 GSH 含量的高低,可稀释几个梯度后再进行测量。
4、 因为试剂一中含有蛋白质沉淀剂,因此上清液不能用于蛋白浓度测定。