YFX0210
100管/48样
¥510
微量法
Ca++Mg++ - ATP酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化ATP水解生成ADP和无机磷。
根据Ca++Mg++ - ATP酶分解ATP生成ADP及无机磷,通过测定无机磷的量来确定ATP酶活性高低。
名称 |
规格 |
储存条件 |
提取液 |
液体100mL ×1瓶 |
4℃ |
试剂一 |
液体10mL ×1瓶 |
4℃ |
试剂二 |
粉剂×1瓶:临用前加入6mL蒸馏水充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 |
-20℃ |
试剂三 |
液体2mL ×1瓶 |
4℃ |
试剂四 |
粉剂×1瓶:用时加入3mL蒸馏水, 4℃保存。 |
4℃ |
试剂五 |
粉剂×1瓶:用时加入25mL蒸馏水,溶解后 4℃保存一周。 |
4℃ |
试剂六 |
粉剂×1瓶:用时加入25mL蒸馏水,溶解后 4℃保存一周。 |
4℃ |
试剂七 |
液体25mL ×1瓶 |
室温 |
试剂八 |
液体10mL ×1瓶:10mmoL/L 标准磷贮备液。 |
4℃ |
0.5μmoL/mL 标准磷应用液配制:将试剂八 20 倍稀释,即取 0.1mL 试剂八加 1.9mL 蒸馏水充分混匀。 |
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定磷剂的配制:按 H2O: 试剂五:试剂六:试剂七=2:1:1:1 的比例配制,配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,定磷剂现用现配。 |
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注意:配试剂最好用新的玻璃烧杯、玻棒和玻璃移液器,避免磷污染。 |
1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、细胞/细菌:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血浆/血清:直接检测。
1、 空白管务必要注意是否有磷污染,如有磷污染,实验结果不能使用。
2、 由于每一个样都必须做对照,本试剂盒 100 管只能测 48 份 Ca ++ Mg ++ -ATP 酶。
3、 此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。避免磷污染是检测成败的关键。
4、 空白管和标准管只要做一管。