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4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI )

  • 产品编号:

    YD0020

  • 产品规格:

    10mg

  • 目录价格:

    ¥800

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产品简介
产品特点
实验案例
注意事项

产品简介

DAPI是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放蓝色荧光,亮度增强约20倍。DAPI常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI具有很高的光漂白承受水平,能用来检测酵母线粒体DNA、叶绿体DNA、病毒DNA以及染色体DNA等。

在较低浓度(1 µg/mL)时,DAPI不可渗透于活细胞,但可用作固定细胞或组织部分的核染色剂。在较高浓度(10 µg/mL)时,DAPI可用于染色活细胞。

产品特点



实验案例

使用方法(仅供参考)

对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。如果要进行免疫荧光染色,染色完成后再进行 DAPI 染色。如果 不需要进行其他染色,则直接进行后续的 DAPI 染色。

1. 用 ddH2O 将DAPI 溶解,制得1 mg/mL DAPI 水溶液,-20℃避光保存。

2. 取适量DAPI水溶液加到PBS中,制备成5 µg/mL 的DAPI溶液。

3. 对于贴壁细胞(去除孔板中的培养基)或组织切片,加入少量 DAPI 染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。

4. 在室温培养细胞 10~20 min。

5. 用 PBS 或合适的缓冲液洗细胞两次,每次 3-5 min,洗涤完成后加入50 μL PBS 防止细胞干掉。

6. 用带有 360 nm 激发波长,460 nm 发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。

注意事项

1、使用前请将产品瞬时离心至管底,再进行后续实验。

2、相较于染色细菌,DAPI 染料对哺乳动物细胞染色更加灵敏,染色死活细菌时推荐在 PBS 或 150 mM NaCl 中溶解为终浓度 10 μg/mL 的染色液,室温染色 30 min。通常对于死细胞的染色要比活细胞染色亮度高。

3、用于细胞核染色时,推荐DAPI 工作浓度为 0.5-10 μg/mL。

4、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓淬灭。

5、DAPI 对人体有害,请穿实验服并戴一次性手套操作,注意适当防护。

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