YFX0705
50管/24样
¥580
可见分光光度计法
DPPH 自由基一种很稳定的氮中心的自由基,是样本抗氧化能力的重要指标之一,广泛应用于抗氧化类食品、保健品及药品的研究中。
DPPH 自由基有单电子,其醇溶液呈紫色,在 515 nm 处有强吸收。当有抗氧化剂存在时,DPPH 自由基被清除,其溶液颜色变浅,515 nm 的吸光度下降,在一定范围内其吸光度的变化与自由基被清除的程度成正比。本试剂盒中,通过吸光度下降的程度来反映样本清除 DPPH 自由基的能力。
名称 |
规格 |
储存条件 |
提取液 |
液体50mL ×1瓶 |
4℃ |
试剂一 |
无水乙醇60mL ×1瓶,自备。 |
室温 |
试剂二 |
粉剂×1 支(0.6 mL EP 管放于 8 mL 试剂瓶中),4℃保存。临用前加入 6.08 mL 试剂一振荡溶解,用不完的试剂可于-20℃保存一月,建议分装保存;临用前根据试验所需量按照试剂二: 试剂一(V:V)= 4:21 的比例配制成工作液,现配现用,用不完的工作液可于 4℃保存一周。 |
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试剂三 |
粉剂×1 支,10 mg 维生素 C,4℃保存。临用前加入 1 mL 提取液,充分振荡溶解;配成 10 mg/mL 维生素 C 溶液,用于阳性对照。 |
1、植物样本的制备:将新鲜样品置于 60℃烘箱烘干至恒重,研钵研碎(或粉碎机粉碎),过 30~50 目筛。称取约 0.05 g 样本,加入 1 mL 提取液,40℃水浴浸提 30 min。室温 10000 rpm 离心 10 min, 取上清,置冰上待测。
2、红酒、果汁等液体样本:吸取 100 µL 样本溶液加入 900 µL 提取液,旋涡振荡混匀,室温10000 rpm 离心 10 min,取上清,置冰上待测。
3、提取物或者药物:可用提取液配制成一定浓度,如 5 mg/mL。
1、 同样本清除 DPPH 自由基的能力可能相差很大,如果要比较不同样品的 DPPH 自由基清除能力,建议对于同一批样品加入等量的样品,红酒、组织匀浆、果汁等液体样品加入同样体积,提取物(或者药物)配制成同样浓度。在比较时,将样本根据预实验结果进行适当调整,比较同样浓度(相同稀释倍数)的清除率大小。
2、 不同样本清除 DPPH 自由基的能力可能相差很大,为保证实验结果的准确性,样本要根据预实验结果进行适当调整(如清除率大于 90%,建议将提取的样本用提取液进行稀释;清除率小于 5%, 建议加大烘干样本质量或液体样本体积进行提取)。
3、 样品建议当天提取当天检测。