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线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性检测试剂盒

  • 产品编号:

    YFX0152

  • 产品规格:

    100管/96样

  • 目录价格:

    ¥2650

  • 测试方法:

    微量法

  • 说明书下载:

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产品简介
试剂盒组成
样本处理方式
注意事项

产品简介

线粒体复合体Ⅰ(EC 1.6.5. 3)又称NADH-CoQ 还原酶或NADH脱氢酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。该酶催化一对电子从NADH 传递给CoQ,同时可使O2还原生成O2.-,是呼吸电子传递链上产生O2.-的主要部位。测定该酶活性,不仅可以反映呼吸电子传递链(ETC)状态,而且可以反映活性氧(ROS)生成状态。

线粒体复合体Ⅰ能够催化NADH脱氢生成 NAD+,在340nm下测定NADH的氧化速率计算出该酶活性的大小。

试剂盒组成

名称          

规格                                                  

储存条件   

试剂一

液体100mL ×1瓶

-20℃

试剂二

液体20mL ×1瓶

-20℃

试剂三 

液体1.5mL ×1瓶

-20℃

试剂四

液体25mL ×1瓶

-20℃

试剂五 

液体1mL ×1瓶

-20℃

试剂六

粉剂×1 支:用时加入2mL蒸馏水,现配现用。

-20℃

工作液的配制:临用前将试剂五转移到试剂四中混合溶解;现配现用。

样本处理方式

1、准确称取0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

2、将匀浆600g,4℃离心 5min。

3、弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。

4、上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅰ(此步可选做)。

5、步骤4中的沉淀即为线粒体,加入200uL试剂二和2uL试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10秒,重复30次),用于复合体Ⅰ酶活性测定。

注意事项

参考说明书

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