YFX0213
50管/48样
¥5180
紫外分光光度法
乙酰辅酶 A 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶 A 汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化,经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水,释放能量用于 ATP 合成。此外,乙酰辅酶 A 是合成脂肪酸,酮体,胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。
苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和 NAD 生成草酰乙酸和 NADH。柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶 A 和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶 A。利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应,乙酰辅酶A 含量和NADH 的生成速率成正比,340nm 下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶 A 含量的高低。
名称 |
规格 |
储存条件 |
试剂一 |
液体50mL ×1瓶 |
4℃ |
试剂二 |
粉剂×1 支:临用前加入 500µL 试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃ 保存,禁止反复冻融。 |
-20℃ |
试剂三 |
液体20μL×1支:临用前加入500µL试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 |
4℃ |
试剂四 |
粉剂×1 瓶:临用前加入 45mL 试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃ 保存,禁止反复冻融。 |
-20℃ |
试剂五 |
液体60mL ×1瓶 |
4℃ |
工作液的配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×0.92 mL),将试剂二、三和四按照1:1:90的比例混合,或者直接把试剂二和试剂三加入到试剂四中混匀(可以测定48样);加样前置37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴锅中预热30 min;现配现用. |
1、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、细菌或细胞:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104 个):试剂一体积(mL)为 500~1000:1 的比例(每 500 万细菌或细胞加入1mL 试剂一),超声波破碎细菌或细胞(功率20%,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
1、本试剂盒最低检测限为 1.6nmol/mL。