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小鼠活性氧(ROS)ELISA 试剂盒

  • 产品编号:

    YFXEM00485

  • 产品规格:

    48T/ 96T

  • 目录价格:

    ¥1000/ ¥1500

  • 实验应用:

    检测小鼠相关样本中活性氧(ROS)的含量

  • 反应种属:

    小鼠

  • 测试方法:

    双抗体一步夹心法

  • 说明书下载:

    点击下载

产品简介
产品特点
特异性
重复性
试剂盒组成
样本处理方式
注意事项
应用文献

产品简介

本试剂盒采用双抗体一步夹心法测定标本中活性氧(ROS)的水平。向预先包被活性氧(ROS)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的活性氧(ROS)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

产品特点

1、准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值≥ 0.9900。

2、灵敏度:最低检测浓度小于1.0ng/mL。

特异性

检测小鼠 相关样本中的活性氧(ROS),且与其它相关蛋白无明显交叉反应。

重复性

板内、板间变异系数均小于15%。

试剂盒组成

试剂盒成分

96孔

48孔

储存温度

说明书

1份

1份

 

封板膜

2片(48)

2片(96)

 

密封袋

1个

1个

 

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

2-8℃

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

2-8℃

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0ng/mL、7.5ng/mL、15ng/mL、30ng/mL、60ng/mL、120ng/mL。

样本稀释液

6mL

3mL

2-8℃

检测抗体-HRP

10mL

5mL

2-8℃

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

2-8℃

注:20×洗涤缓冲液使用前用蒸馏水按1:20的比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

底物A

6mL

3mL

2-8℃

底物B

6mL

3mL

2-8℃

终止液

6mL

3mL

2-8℃

样本处理方式

1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。

3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

注意事项

1、试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

2、实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3、浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4、严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5、所有液体组分使用前充分摇匀。

应用文献

※ IF=9.8: Yiling Ge, Sheng Yang , Tianyi Zhang, et al. Ferroptosis participated in inhaled polystyrene nanoplastics-induced liver injury and fibrosis. Science of the Total Environment,2024 Mar 15:916:170342.

※ IF=8.9:Sheng Yang, Tianyi Zhang , Yiling Ge, et al. Inhalation exposure to polystyrene nanoplastics induces chronic obstructive pulmonary disease-like lung injury in mice through multi-dimensional assessment. Environmental Pollution 347 (2024) 123633.

※ IF=39.3: Yangle Wu, Zengzheng Du , Lin Li, et al. Camouflaging attenuated Salmonella by cryo-shocked macrophages for tumor-targeted therapy. Signal Transduction and Targeted Therapy, volume 9, Article number: 14 (2024).

※ IF=9.112,Tianyi Zhang,Sheng Yang,Yiling Ge. Multi-dimensional evaluation of cardiotoxicity in mice following respiratory exposure to polystyrene nanoplastics. Particle and Fibre Toxicology ,  (2023) 20:46.

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